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可見分光光度計(jì)是一種常用的分析儀器，用于測(cè)量樣品在可見光區(qū)的吸光度。為了保證其測(cè)量的準(zhǔn)確性和可靠性，定期校準(zhǔn)是至關(guān)重要的。以下是對(duì)可見分光光度計(jì)校準(zhǔn)過程的詳細(xì)描述：
一、校準(zhǔn)前的準(zhǔn)備
1. 環(huán)境條件檢查
- 需確保校準(zhǔn)環(huán)境穩(wěn)定。溫度應(yīng)控制在儀器規(guī)定的范圍內(nèi)，通常為 15℃ - 35℃，避免溫度波動(dòng)過大影響儀器性能。濕度一般要求在 40% - 80%，防止高濕度導(dǎo)致電子元件受潮或出現(xiàn)凝露現(xiàn)象。同時(shí)，要將儀器放置在平穩(wěn)的工作臺(tái)上，避免振動(dòng)干擾。
2. 儀器外觀與清潔檢查
- 仔細(xì)檢查儀器外觀，查看是否有損壞、劃痕或松動(dòng)的部件。特別要注意比色皿架、波長調(diào)節(jié)旋鈕等部位的完整性。
- 對(duì)儀器進(jìn)行清潔，用干凈的軟布擦拭外殼，去除灰塵和污漬。對(duì)于光學(xué)部件，如光源燈罩、比色皿架等，要用專門的光學(xué)清潔工具輕輕擦拭，防止劃傷光學(xué)表面。
二、波長準(zhǔn)確性校準(zhǔn)
1. 選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
- 常用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)有鈥濾光片、鐠釹濾光片等。這些濾光片具有特定的吸收波長，可用于準(zhǔn)確校準(zhǔn)儀器波長。例如，鈥濾光片在 279.0nm、287.0nm 等波長處有特征吸收峰。
2. 校準(zhǔn)操作步驟
- 將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(如鈥濾光片)正確安裝在比色皿架上，注意安裝方向要正確，確保濾光片表面與光路垂直。打開儀器電源，讓儀器預(yù)熱一段時(shí)間，一般為 15 - 30 分鐘，使儀器達(dá)到穩(wěn)定的工作狀態(tài)。
- 通過儀器的操作界面設(shè)置掃描波長范圍，使其包含標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的特征吸收波長。然后啟動(dòng)掃描程序，儀器開始測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在不同波長下的吸光度。
- 掃描完成后，觀察測(cè)量得到的吸光度峰值對(duì)應(yīng)的波長是否與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的特征波長相符。如果有偏差，按照儀器的操作手冊(cè)進(jìn)行調(diào)整。調(diào)整方法可能因儀器型號(hào)而異，一般是通過調(diào)節(jié)波長調(diào)節(jié)旋鈕或在軟件界面輸入校準(zhǔn)系數(shù)來進(jìn)行。
三、吸光度準(zhǔn)確性校準(zhǔn)
1. 使用標(biāo)準(zhǔn)溶液
- 采用已知濃度和吸光度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，如一定濃度的重鉻酸鉀溶液。將標(biāo)準(zhǔn)溶液倒入比色皿中，約 3/4 高度即可。用擦鏡紙擦拭比色皿外壁，避免指紋和污漬影響測(cè)量。
2. 吸光度測(cè)量與校準(zhǔn)
- 將裝有標(biāo)準(zhǔn)溶液的比色皿放入比色皿架，正確定位。在儀器操作界面上設(shè)置測(cè)量波長，該波長應(yīng)是標(biāo)準(zhǔn)溶液有明確吸光度值的波長。
- 進(jìn)行吸光度測(cè)量，讀取測(cè)量值并與標(biāo)準(zhǔn)溶液的理論吸光度值進(jìn)行比較。如果存在差異，通過儀器的校準(zhǔn)功能進(jìn)行調(diào)整。調(diào)整方法可能是對(duì)滿度吸光度進(jìn)行重新設(shè)定，或者根據(jù)儀器提示輸入校準(zhǔn)因子。
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