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GPC凝膠凈化系統(tǒng)是一種高效的分離純化工具，廣泛應(yīng)用于科學(xué)研究和工業(yè)領(lǐng)域。為了確保其性能穩(wěn)定、數(shù)據(jù)準(zhǔn)確，操作人員必須遵循一系列嚴(yán)格的操作規(guī)范和維護(hù)流程。將詳細(xì)介紹GPC凝膠凈化系統(tǒng)的使用方法和日常維護(hù)注意事項。
一、流動相的準(zhǔn)備與使用
1. 流動相純度要求：建議使用色譜純及以上級別的流動相(如乙酸乙酯：環(huán)己烷=1:1或二氯甲烷)。流動相的純度直接影響到分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。
2. 配置流動相：根據(jù)凝膠凈化色譜柱上的標(biāo)簽規(guī)格要求配置相應(yīng)的流動相。對于特定標(biāo)簽的凝膠色譜柱，應(yīng)嚴(yán)格按照規(guī)定的流動相比例進(jìn)行配置，避免使用不合適的流動相對色譜柱造成損害。
3. 過濾與脫氣：流動相應(yīng)使用0.45微米的濾膜過濾，并超聲脫氣混合均勻。這一步驟能夠有效去除流動相中的雜質(zhì)和氣泡，保證系統(tǒng)的正常運(yùn)行。
4. 適量配制：由于方法中的流速為5mL/min，如果實驗樣品數(shù)量較多，應(yīng)一次性配好充足的流動相，避免在實驗過程中添加。中途添加流動相易產(chǎn)生氣泡，導(dǎo)致基線不穩(wěn)定。
二、樣品處理
1. 樣品溶劑選擇：在選擇樣品溶劑時，應(yīng)盡量選擇與流動相極性相符的溶劑，推薦使用流動相作為樣品溶劑。這有助于減少樣品對凝膠色譜柱的影響，提高分離效果。
2. 樣品過濾：樣品在進(jìn)樣前必須經(jīng)過0.45微米微孔膜過濾，以防止顆粒物進(jìn)入系統(tǒng)，堵塞色譜柱或損壞儀器。
三、系統(tǒng)操作
1. 開機(jī)準(zhǔn)備：將儀器及電腦各部分電源打開，待檢測器自檢通過后(約2分鐘)，再打開工作站軟件。確保所有連接正常，通訊成功。
2. 清洗與平衡：點擊工作站主界面左邊的【手動控制】，選擇【GPC信息】窗口，點擊【餾分】，輸入注射泵體積“8” mL，點擊【清洗】。完成后，設(shè)置輸液泵流量為5 mL/min，點擊【運(yùn)行】。色譜柱平衡時間一般為30分鐘，若長期未使用則需要適當(dāng)延長平衡時間。
3. 方法查看與批表編輯：在【方法管理】中查看方法參數(shù)，新建批表并選擇運(yùn)行方法。確保所有設(shè)置正確無誤后，再進(jìn)行樣品分析。
四、日常維護(hù)
1. 輸液泵壓力監(jiān)控：如發(fā)現(xiàn)控制面板上的輸液泵壓力變大或報警停泵，需將儀器的放空濾片座卸下來用流動相超聲清洗10~20分鐘后再安裝使用。
2. 長時間不用時的保養(yǎng)：若長時間不使用GPC凝膠系統(tǒng)，請先用對應(yīng)的流動相將凝膠色譜柱沖洗10～20分鐘，然后取下并用聚四氟堵頭將其兩端封好。下次使用時再重新安裝，并用流動相沖洗十分鐘以上，使其基線達(dá)到平穩(wěn)后再使用。
3. 管路清洗：若使用GPC儀器做茶葉等顏色較深的樣品，當(dāng)回收率降低時，每隔半個月將凝膠凈化色譜柱拆下來，用不銹鋼兩通替代柱子連接管路，把流動相換成甲醇：丙酮(1:1)，沖洗管路一個小時，然后換回流動相沖洗二十分鐘，再把凝膠柱安裝上繼續(xù)使用。
4. 保護(hù)柱(預(yù)柱)清洗：當(dāng)回收率降低時，如有保護(hù)柱(預(yù)柱)，用甲醇：丙酮(1:1)，低流速反向沖洗二十分鐘。
5. 廢液處理：及時處理廢液瓶，避免廢液過滿而流出造成的污染。
6. 自動液體處理器維護(hù)：在使用過程中不要隨便移動或變更樣品盤上的樣品架，以防進(jìn)樣針折斷等事故發(fā)生。實驗結(jié)束后，盡可能做一些防塵措施，以延長其使用壽命。
五、實驗結(jié)束后的操作
實驗結(jié)束后，請點擊工作站左側(cè)下方的【手動操作】按鈕，選擇【GPC信息】項，點擊【輸液泵】中的【停止】按鈕，關(guān)閉輸液泵后，再關(guān)閉工作站，最后分別將儀器及電腦的電源關(guān)閉。
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