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杭州實(shí)了個(gè)驗(yàn)生物科技有限公司
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伯樂電泳槽的使用方法
伯樂電泳槽（如 1658001 和 1658003）是一種廣泛用于核酸（DNA、RNA）和蛋白質(zhì)分離的實(shí)驗(yàn)設(shè)備。以下將詳細(xì)介紹伯樂電泳槽的使用方法，從設(shè)備準(zhǔn)備到實(shí)驗(yàn)完成的每個(gè)步驟都涵蓋其中，以幫助實(shí)驗(yàn)人員高效、安全地操作該設(shè)備。
一、設(shè)備準(zhǔn)備
1.1 檢查設(shè)備
確保電泳槽的所有組件（凝膠托架、電極組件、緩沖液槽等）完整無損。
檢查電極線連接無破損，確保實(shí)驗(yàn)安全。
確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境干燥，避免設(shè)備短路。
1.2 選擇緩沖液
根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)選擇適合的緩沖液：
核酸實(shí)驗(yàn)：使用 TAE（Tris-Acetate-EDTA）或 TBE（Tris-Borate-EDTA）緩沖液。
蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)：使用 SDS-Tris-Glycine 緩沖液。
二、凝膠制備
2.1 核酸實(shí)驗(yàn)（瓊脂糖凝膠）
準(zhǔn)備瓊脂糖溶液：
根據(jù)目標(biāo)片段大小，選擇適合的濃度（通常 0.8%-2%）。
例如：分離大片段 DNA（>1000 bp）用 0.8%-1% 的瓊脂糖；分離小片段 DNA（<500 bp）用 1.5%-2%。
稱取適量瓊脂糖粉末，加入緩沖液（如 TAE 或 TBE），攪拌均勻。
加熱溶解：
在微波爐中加熱瓊脂糖混合液，直至溶解（無顆粒）。
冷卻至約 50℃。
倒入凝膠托架：
將凝膠溶液倒入凝膠托架中，插入梳子（形成樣品槽），靜置約 20-30 分鐘直至凝膠固化。
2.2 蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)（聚丙烯酰胺凝膠）
選擇合適的預(yù)制膠或自制膠：
使用伯樂的 Ready Gel（貨號：1610150）預(yù)制膠，節(jié)省時(shí)間。
若自制，按照目標(biāo)分離分子量配置分離膠和濃縮膠，澆注至 Mini-PROTEAN 電泳槽內(nèi)。
安裝凝膠：
將固化后的聚丙烯酰胺凝膠固定在伯樂電泳槽的凝膠夾上。
三、樣品準(zhǔn)備
3.1 樣品處理
核酸樣品：
使用 DNA 上樣緩沖液（如 6X Loading Dye）與樣品混合。
緩沖液通常含有甘油或溴酚藍(lán)，可提高樣品密度并便于追蹤遷移進(jìn)程。
蛋白質(zhì)樣品：
使用 SDS 上樣緩沖液，將蛋白樣品變性處理（通常需 95℃ 水浴加熱 5 分鐘）。
加入染料（如溴酚藍(lán)）以便于電泳過程中觀察。
3.2 樣品加樣
用加樣槍將樣品緩慢注入凝膠樣品槽，避免氣泡進(jìn)入。
在最后一個(gè)樣品槽中加入分子量標(biāo)準(zhǔn) Marker（DNA Ladder 或蛋白質(zhì) Marker），以對比目標(biāo)片段大小。
四、電泳運(yùn)行
4.1 安裝電泳槽
將凝膠托架安裝到電泳槽中，確保凝膠正確放置。
加入緩沖液至液面，確保緩沖液覆蓋凝膠并接觸電極。
4.2 連接電源
將電泳槽連接到伯樂 PowerPac 電源（如 1645050）。
確保電極線紅色接正極，黑色接負(fù)極。
4.3 設(shè)置電壓和運(yùn)行時(shí)間
核酸實(shí)驗(yàn)：
設(shè)置電壓為 50-150 V，運(yùn)行時(shí)間 30-90 分鐘。
根據(jù) DNA 片段大小調(diào)整運(yùn)行時(shí)間，染料需運(yùn)行至凝膠 2/3 處。
蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)：
設(shè)置電壓為 100-200 V，運(yùn)行時(shí)間 30-60 分鐘。
4.4 運(yùn)行監(jiān)控
實(shí)驗(yàn)過程中，觀察溴酚藍(lán)或其他染料的遷移情況。
定期檢查緩沖液液位，確保電泳過程中不會(huì)干涸。
五、實(shí)驗(yàn)完成與結(jié)果處理
5.1 停止電泳
關(guān)閉電源，斷開電極線。
小心取出凝膠托架。
5.2 核酸實(shí)驗(yàn)染色
將瓊脂糖凝膠浸入染色液中（如 Ethidium Bromide（EB） 或 SYBR Green）。
EB 染色：浸泡 15-30 分鐘后脫色。
SYBR Green：快速染色，靈敏度更高。
使用脫色液（如去離子水）清洗凝膠，去除背景染色。
5.3 蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)染色
將聚丙烯酰胺凝膠浸入染色液（如 考馬斯亮藍(lán) 或 銀染液）。
根據(jù)染色液說明，完成染色和脫色步驟。
5.4 結(jié)果觀察
使用伯樂的成像系統(tǒng)（如 Gel Doc EZ System，貨號：1708195）觀察凝膠條帶。
分析條帶的分子量和樣品濃度，記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
六、清潔與維護(hù)
6.1 清潔設(shè)備
倒掉緩沖液，用去離子水清洗緩沖液槽。
拆卸電極組件，用濕布擦拭干凈。
6.2 檢查組件
檢查電極線和電泳槽是否有損壞或老化。
如發(fā)現(xiàn)異常，及時(shí)更換或聯(lián)系供應(yīng)商維修。
6.3 存放設(shè)備
將設(shè)備存放在干燥、無塵的環(huán)境中，避免電極組件長期接觸水分。
七、常見問題及解決方法
7.1 電泳條帶彎曲
原因：電場不均或緩沖液液位不足。
解決：檢查緩沖液覆蓋是否完，確保電泳槽水平放置。
7.2 條帶擴(kuò)散
原因：運(yùn)行時(shí)間過長或緩沖液溫度過高。
解決：縮短運(yùn)行時(shí)間或更換冷卻緩沖液。
7.3 樣品未遷移
原因：電極線連接錯(cuò)誤或電壓設(shè)置不當(dāng)。
解決：檢查電極連接，確保正負(fù)極接線無誤。
總結(jié)
伯樂電泳槽操作簡單、高效，但需要嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)規(guī)范，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確無誤。以上使用方法適用于伯樂的各種電泳槽設(shè)備（如 1658001 和 1658003），如果在使用過程中遇到特殊問題，建議參考產(chǎn)品手冊或聯(lián)系技術(shù)支持團(tuán)隊(duì)。通過規(guī)范操作，您將輕松實(shí)現(xiàn)核酸或蛋白質(zhì)的精準(zhǔn)分離與分析！
