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技術(shù)文章

改良Skirrow氏瓊脂基礎(chǔ)的原理及實驗現(xiàn)象

閱讀:520          發(fā)布時間:2024-4-9

一、用途:

 用于空腸彎曲桿菌的分離培養(yǎng)(GB4789.9-2014,GB4789.28-2013,ISO標(biāo)準(zhǔn))
二、實驗原理:
 蛋白胨、酵母浸粉和胰酪蛋白胨提供碳源、氮源、維生素和礦物質(zhì);氯化鈉提供均衡的滲透壓;無菌凍融脫纖維羊血提供額外的營養(yǎng)物質(zhì);鐵、焦亞硫酸鈉和丙酮酸鈉有利于空腸彎曲菌的生長;TMP、多粘菌素B和萬古霉素可抑制樣本中非彎曲菌的生長,從而便于分離空腸彎曲菌;瓊脂是凝固劑。
三、培養(yǎng)基配方(g/L)

捕獲11.JPG

 FBP溶液:丙酮酸鈉、焦亞硫酸鈉、鐵各0.25g溶解于100mL純化水中,用0.22μm微孔濾膜過濾除菌。
 抗生素溶液:稱取頭孢哌酮0.032g,兩性霉素B0.01g,利福平0.01g,溶解于5mL 50%無菌乙醇溶液中。
 配制方法:稱取基礎(chǔ)培養(yǎng)基4.25g,加熱攪拌溶解于100ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至50-55℃左右時,加入1ml過濾除菌的FBP濃原液、一支改良Skirrow氏瓊脂基礎(chǔ)添加劑(萬古霉素mg,TMP0.5mg,多粘菌素B 250 IU)1mL和無菌凍融脫纖維羊血5ml,混勻,傾入無菌平皿。
四、試驗方法:
 1、制備質(zhì)控菌液。
 2、將質(zhì)控菌液劃線接種于平板。
 3、42±1℃微需氧培養(yǎng)24-48小時,記錄實驗結(jié)果。
五、結(jié)果觀察與解釋
 接種以下質(zhì)控菌株,42±1℃微需氧培養(yǎng)24-48小時:

捕獲22.JPG

圖1-1 改良Skirrow氏瓊脂基礎(chǔ)質(zhì)控結(jié)果
a:空腸彎曲菌,b:大腸埃希氏菌,c:jin黃色葡萄球菌

六、注意事項
 本培養(yǎng)基僅為細(xì)菌鑒定的一部分,需做其他補(bǔ)充試驗。



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