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凱氏定氮法與分光光度法的優(yōu)缺點(diǎn)
凱氏定氮法的優(yōu)點(diǎn)：可用于所有食品的蛋白質(zhì)分析中；操作相對(duì)比較簡單；實(shí)驗(yàn)費(fèi)用較低；結(jié)果準(zhǔn)確，是一種測定蛋白質(zhì)的經(jīng)典方法；用改進(jìn)方法（微量凱氏定氮法）可測定樣品中微量的蛋白質(zhì)。
缺點(diǎn)：終測定的是總有機(jī)氮，而不只是蛋白質(zhì)氮；實(shí)驗(yàn)時(shí)間太長(至少需要2h才能完成)；精度差，精度低于雙縮脲法；所用試劑有腐蝕性。
分光光度法的優(yōu)點(diǎn)：靈敏度高；儀器設(shè)備簡單，操作簡便、快速；應(yīng)用廣泛。
缺點(diǎn)是：準(zhǔn)確度相對(duì)不高；有的檢測不可用，有限制性。
蛋白質(zhì)與硫酸和催化劑一同加熱消化，使蛋白質(zhì)分解，分解的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨。然后堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后再以硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù)，并換算成蛋白質(zhì)含量。
賽亞斯凱氏定氮儀概述：
KDN凱氏定氮儀是依據(jù)經(jīng)典(凱氏定氮)方法設(shè)計(jì)的自動(dòng)測氮蒸餾系統(tǒng)。儀器主要工作流程有：自動(dòng)加水（含自動(dòng)水位檢測功能）、自動(dòng)加堿（按鈕控制）、手動(dòng)加酸（手工配置）、自動(dòng)蒸餾（按鈕控制）等幾部分。該儀器操作簡單；使用安全、可靠；省時(shí)、省力；適用于糧油檢測、飼料分析、植物養(yǎng)分測試、土肥檢測、醫(yī)藥、化工等行業(yè)的分析、教學(xué)及研究中，是操作使用人員的理想工具。2.工作原理 (凱氏原理)：
蛋白質(zhì)是含氮的有機(jī)化合物。食品和硫酸及催化劑一同加熱消化，使蛋白質(zhì)分解，分解的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨。然后在堿化蒸餾作用下使氨游離，釋放出來的氨氣和水蒸氣一起經(jīng)過冷凝管冷凝后，進(jìn)入裝有硼酸的錐形瓶中。被硼酸吸收后再用硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù)，即得到蛋白質(zhì)含量。
2.1.（消化爐部分）有機(jī)物中的銨根在強(qiáng)熱和催化劑及濃H2SO4 作用下，硝化生成（NH4）2SO4
反應(yīng)式為： 2NH2-+H2S04+2H+＝(NH4)2S04
2.2.（蒸餾器部分）裝有消化后樣品的消化管在高溫蒸汽作用下與堿作用，放出NH3 和水蒸氣，收集于H3BO3 溶液中
反應(yīng)式為: (NH4)2SO4+2NaOH高溫蒸汽＝2NH3↑+2H2O+Na2SO4
2NH3+4H3BO3＝(NH4)2B4O7+5H2O
2.3. （滴定部分）用已知濃度的H2SO4（或HCI）標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)HCI消耗量計(jì)算出氮的含量，然后乘以相應(yīng)的換算因子，得到蛋白質(zhì)的含量
反應(yīng)式為： (NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O＝(NH4)2SO4+4H3BO3
(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O＝2NH4Cl+4H3BO3
3.操作步驟：
取樣→ 消化 → 蒸餾→ 滴定 → 計(jì)算
4.整套儀器組成：
含消化爐(本公司供選配KDN-04C、KDN-08C、KDN-20C等消化爐型號(hào))和KDN系列凱氏定氮儀蒸餾器組成。
二．技術(shù)參數(shù)
1．測定品種：糧食、飼料、食品、乳制品、飲料、土壤、水、藥物、沉淀物和化學(xué)品等。
2．工作方式：半自動(dòng)。
3．測定數(shù)量：采用單個(gè)連續(xù)蒸餾測量。
4．測定范圍：含氮在0.1～200mgN（毫克氮） （含氮量0.1%～99%）
5．回收率：≥99%（相對(duì)誤差，包括消化過程）
6．重復(fù)率：相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差＜±1%
7．工作時(shí)間：蒸餾時(shí)間5-15分鐘（ 根據(jù)樣品和含氮量的不同而定）
8．額定電壓： 220V/50Hz。
9. 額定功率：800W
10．冷卻水消耗： 3-4L/min（水溫低于25度）
