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賽默飛氣相色譜針對奶粉中香蘭素和乙基香蘭素的測定
閱讀：673 發(fā)布時間：2019-7-16摘要
以二氯甲烷為溶劑，提取奶粉中的香蘭素和乙基香蘭素，經(jīng)分散固相萃 取方法凈化后，用Trace1310氣相色譜儀測定，外標法定量，線性良好，回收 率和重現(xiàn)性均滿足分析要求。
引言
香蘭素（vanillin），又叫香草醛，學名3-甲氧基-4-羥基ben甲醛；乙基 香蘭素（ethyl vanillin），學名3-乙氧基-4-羥基ben甲醛。兩者均為白色或微 黃色結(jié)晶粉末，微溶于水，具有香莢蘭香氣及濃郁的奶香，是重要的食品添 加劑，廣泛用作食品、飲料以及日化用品等的增香劑。但是，大劑量使用香 蘭素等香料將有害健康。根據(jù)《食品安全國家標準食品添加劑使用規(guī)定》 GB2760-2011要求，凡使用范圍涵蓋0至6個月嬰幼兒配方食品不得添加任何 食用香料。2012年7月有報道稱，幾大洋品牌的I段奶粉被檢出添加了國家禁 止的香蘭素，因此需要建立相關檢測方法對奶粉中的香蘭素進行檢測。
目前關于香蘭素和乙基香蘭素的測定方法主要有分光光度法、電化學 法、液相色譜法、氣相色譜和氣質(zhì)聯(lián)用法，由于HPLC法對樣品凈化程度 要求不高，因此樣品預處理方面的研究較少。本方法采用二氯甲烷提取，分 散固相萃取凈化，建立同時測定嬰幼兒配方奶粉中香蘭素和乙基香蘭素含量 的氣相色譜法。
實驗部分
主要儀器設備與試劑
儀器：氣相色譜儀，Trace 1310，美國ThermoFisher。
試劑：二氯甲烷，色譜純；氯化鈉，分析純； Cleanert C18固體吸附劑；香蘭素和乙基香蘭素標準品。
樣品前處理方法
稱取5 g奶粉（到0.01 g）于100 mL容量瓶中， 加入20 mL水，振蕩，使成為均勻奶液，加水定容至刻 度，搖勻。用移液管移取5 mL奶液于15 mL離心管中，加 入2 g NaCl，5 mL二氯甲烷，蓋好蓋子振蕩提取5 min，靜 置2 min，然后以10000 rpm離心5 min，小心全部移取下 層有機層，過無水硫酸鈉后，定容至5 mL，加入150 mg C18吸附劑，渦旋1 min，靜置后吸取上層清液過0.2 µm濾 膜，待氣相色譜儀測定。
樣品的測定
上述得到的樣品溶液直接進樣，氣相色譜儀檢測，外 標法定量。儀器參數(shù)設置見表1.
結(jié)果與討論
標準樣品的色譜圖和線性
標準樣品中香蘭素和乙基香蘭素的色譜圖如圖1 所示。用標準樣品配制成濃度分別為1 µg/mL, 2.5 µg/ mL,10 µg/mL, 35 µg/mL, 50 µg/mL的系列標準工作液， 進樣1 µL，然后按照以上所述的測定方法進行GC-FID測 定，以標準物質(zhì)的濃度為橫坐標，以各標準物質(zhì)的峰面積 為縱坐標，繪制標準曲線，得到香蘭素和乙基香蘭素的標 準工作曲線如圖2。香蘭素和乙基香蘭素的相關系數(shù)分別 為0.9980和0.9991。
方法的精密度和回收率
對香蘭素和乙基香蘭素的1 µg/mL，2 µg/mL，10 µg/ mL三個水平加標樣品分別進行了3次測定，平均回收 率和相對標準偏差列于表2中。樣品加標的色譜圖見圖 3。選擇1 µg/mL的標準溶液，以噪聲的3倍計算，本方 法中香蘭素和乙基香蘭素的檢測限分別為0.33 µg/mL和 0.25 µg/mL。
對市售4個奶粉樣品中香蘭素和乙基香蘭素的測定
按上述前處理方法測定了4個奶粉樣品中的香蘭素 和乙基香蘭素含量，其中樣品1為I段奶粉，為禁止添加 香蘭素和乙基香蘭素。樣品2、3、4為III段奶粉，可以添 加香蘭素和乙基香蘭素，允許添加量為5 mg/100 mL， 即50 µg/mL。其中100 mL以即食食品計，即沖調(diào)好的 奶液，按照奶粉沖調(diào)說明一般為每100 mL水加入14 g奶 粉。樣品中的香蘭素和乙基香蘭素的含量采用外標法定 量，配制一系列標準工作溶液，以濃度為橫坐標，峰面 積為縱坐標繪制標準曲線，定量結(jié)果按公式（1）換算為 奶液中的含量，列于表3中。
C=Ci×Vi×14 g Ms×100 mL
其中：C 為按照沖調(diào)說明沖調(diào)好的奶液中的含量， 單位為 µg/mL Ci 為經(jīng)前處理后終定容液中的含量，單位 為 µg/mL Vi 為前處理后終定容液的體積，單位為mL Ms 為終定容液中包含的奶粉的質(zhì)量，單位 為g，本方法中為0.25 g
結(jié)論
建立了嬰幼兒配方奶粉中香蘭素和乙基香蘭素的氣 相色譜測定方法。本方法步驟簡單、快捷，精密度高， 具有較好的分離度，雜質(zhì)干擾少，測定結(jié)果準確可靠， 靈敏度高，是測定嬰幼兒配方奶粉中香蘭素、乙基香蘭 素的較好的方法。