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蛋白質(zhì)藥物的生物分析研究-島津液質(zhì)聯(lián)用

閱讀:636          發(fā)布時(shí)間:2019-7-8

基于島津液質(zhì)聯(lián)用平臺(tái)的抗體類藥物生物分析nSMOL解決方案

抗體類藥物的生物分析通常采用ELISA/LBA等傳統(tǒng)生物學(xué)方法。該類經(jīng)典方法雖然靈敏度較高,但定量線性范圍窄、實(shí)驗(yàn)步驟繁瑣,對(duì)于抗體藥物偶聯(lián)物(ADC),雙特異性抗體(Bi-Specific)等創(chuàng)新藥物,難度大且過程復(fù)雜。

島津公司與日本國立癌癥研究中心合作,開發(fā)出通過納米表面定向酶解抗體類藥物Fab區(qū)域的選擇性酶解技術(shù)  nSMOL: nano-Suface and Molecular-Orientation Limited proteolysis。

 

通過nSMOL技術(shù)方案,定量分析血漿中曲妥珠單抗:樣品經(jīng)nSMOL技術(shù)處理后,一級(jí)MS譜圖如圖三所示,紅色箭頭所標(biāo)示的峰來自曲妥珠單抗Fab區(qū)域肽段,其中CDR區(qū)域的特征肽段*囊括在內(nèi)。肽段列表見表一。經(jīng)過優(yōu)化分析,選擇線性關(guān)系良好且無干擾的IYPTNGYTR作為曲妥珠單抗定量的特征肽段之一(m/z542.8>404.7),見圖四和表二,構(gòu)建MRM離子對(duì),可以快速定量樣品中曲妥珠單抗。

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