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瑋馳課堂丨Lonza通過X-VIVO培養(yǎng)基改善患者T細(xì)胞的擴(kuò)增

2022-6-16  閱讀(431)

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隨著越來越多的CAR-T療法批準(zhǔn),CAR-T生產(chǎn)工藝仍然面臨很多挑戰(zhàn)。起始材料復(fù)雜性就是其中很大的一點(diǎn),接受CAR-T治療的患者之前可能接受過放療或化療,而這會(huì)導(dǎo)致他們的細(xì)胞處在功能低下、不健康的狀態(tài)。


如何從復(fù)雜的原材料起始又能穩(wěn)定收獲高質(zhì)量的細(xì)胞,我們認(rèn)為在培養(yǎng)基的選擇上是至關(guān)重要的。

這項(xiàng)實(shí)驗(yàn)比較了市面上的4種培養(yǎng)基,在IL-2和CD3/28刺激下培養(yǎng)PBMC。

 

CFSE熒光染料檢測(cè)淋巴細(xì)胞增殖

圖1:在X-VIVO、 A、T、O 培養(yǎng)基中培養(yǎng)4天的T細(xì)胞增殖比較。細(xì)胞增殖表現(xiàn)為細(xì)胞+培養(yǎng)基對(duì)照組的CFSE倍數(shù)變化。Donor=3

 

從比較中可以看出X-VIVO和 A培養(yǎng)基可以支持更好的細(xì)胞擴(kuò)增。但細(xì)胞數(shù)量不是僅有的評(píng)判指標(biāo)??茖W(xué)家們發(fā)現(xiàn),T細(xì)胞表型是治療效果的重要指標(biāo),通過觀察特定的細(xì)胞表面標(biāo)記物,可以幫助選擇對(duì)治療有效的細(xì)胞亞群。CD45RO+ T細(xì)胞浸潤(rùn)與總生存率(OS)和無病生存率(DFS)的改善顯著相關(guān)

 

第0天和第4天的CD45RA和CD45RO亞型占總T細(xì)胞群的百分比

圖2:在X-VIVO、A、T、O 培養(yǎng)基中培養(yǎng)4天后活力變化,并通過FACS表型分析評(píng)估PBMC(T細(xì)胞)的分化。Donor=3


T細(xì)胞在培養(yǎng)早期自然會(huì)經(jīng)歷生存能力下降,這就是為什么大多數(shù)過程必須超過7-10天。X-VIVO可以提高初始階段的細(xì)胞活率縮短培養(yǎng)過程,并讓收獲的細(xì)胞擁有更好表型。

這項(xiàng)研究表明,在市場(chǎng)上的標(biāo)準(zhǔn)無血清培養(yǎng)基中,X-VIVO培養(yǎng)基的性能優(yōu)于競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手,即增殖周期較短,并收獲更多的CD45RO+T細(xì)胞用于CAR-T治療。

 

 

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