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ELISA試劑盒試驗(yàn)中出現(xiàn)的差錯(cuò)如何糾正？
閱讀：1633發(fā)布時(shí)間：2020-1-25
在ELISA試劑盒的使用過程中，有時(shí)會(huì)出現(xiàn)一些差錯(cuò)，那這些差錯(cuò)如何糾正呢，我們需要找出原因。ELISA試劑盒操作過程多，新手操作不免會(huì)有過失。而這些過失許多是由細(xì)節(jié)不夠好構(gòu)成的，削減過失的方法有許多，下面我們就來說說ELISA試劑盒試驗(yàn)中出現(xiàn)的差錯(cuò)的糾正方法。
1. 評(píng)價(jià)試劑的實(shí)用性，試劑的穩(wěn)定與否，對(duì)率的凹凸到頭重要。在試劑啟用前，應(yīng)進(jìn)行陰、陽(yáng)對(duì)照及樣品重復(fù)對(duì)比試驗(yàn)，斷定試劑符合要求后方可運(yùn)用。
2. 操作前仔細(xì)閱讀說明書，嚴(yán)峻依照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號(hào)的試劑不可混用。值得改善的當(dāng)?shù)兀貜?fù)試驗(yàn)斷定成立后才干改善，比如洗板次數(shù)的掌握等。
3. 加樣要、快速。加樣不，酶生成物的量不能斷定，直接影響顯色作用。其他，顯色的深淺及A值的測(cè)定與參加顯色劑和間斷液的量有關(guān)，所以加樣應(yīng)穩(wěn)重。要求在必定時(shí)刻內(nèi)加樣完畢的試驗(yàn)，假如加樣緩慢，便呈現(xiàn)過失，而且試劑長(zhǎng)時(shí)刻顯露在外，特別室溫過高時(shí)，保存期會(huì)縮短乃至失效。
4. 查驗(yàn)技師應(yīng)具有從事試驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作試驗(yàn)儀器、器械，具有必定總結(jié)和剖析問題的才干，對(duì)試驗(yàn)中呈現(xiàn)的意外狀況能及時(shí)妥善解決。
5. 運(yùn)用校對(duì)過的微量移液器，清掃天然過失。移液器與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要。
6. 嚴(yán)峻掌握顯色時(shí)刻，顯色時(shí)刻過短，參加間斷液反應(yīng)間斷后，底物結(jié)合物的量過少，易呈現(xiàn)假陰性。超越顯色要求時(shí)刻后顯色，應(yīng)判為假陽(yáng)性，這或許與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后當(dāng)即顯色，不可報(bào)陽(yáng)性，這或許是本底顯色的作用。
7. 洗刷*，洗板不*，酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽(yáng)性。其他，洗刷液要新鮮，現(xiàn)用現(xiàn)配，陳腐的洗刷液會(huì)呈現(xiàn)本底增高現(xiàn)象，也或許呈現(xiàn)假陽(yáng)性。
8. 嚴(yán)控反應(yīng)時(shí)刻，反應(yīng)時(shí)刻過長(zhǎng)，酶失活；反應(yīng)時(shí)刻過短，酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛結(jié)合，生成物結(jié)構(gòu)松懈不強(qiáng)健，簡(jiǎn)略洗掉，都或許構(gòu)成假陰性。
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