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技術(shù)文章

谷氨酸脫羧酶自身抗體1型糖尿病檢測(cè)方法臨床意義

閱讀:1601          發(fā)布時(shí)間:2011-11-16

在眾多的GAD抗體檢測(cè)方法中,ELISA、放射結(jié)合法(RBA)和酶促免疫沉淀法(EIP)使用較廣,隨著間接免疫熒光技術(shù)的發(fā)展,IIF也是較常用的初步篩選方法。熒光特征是在猴胰腺抗原基質(zhì)中胰島細(xì)胞呈陽(yáng)性,在猴小腦切片中灰質(zhì)層和顆粒層細(xì)胞胞質(zhì)呈現(xiàn)顆粒狀熒光。
 


在ELISA中,純化的重組GAD或天然GAD結(jié)合到微量板上,加入血清孵育,結(jié)合上的抗體可經(jīng)標(biāo)記二抗結(jié)合而被測(cè)出。RBA法利用放射標(biāo)記的重組GAD或天然GAD,與血清中的抗體共沉淀,用β或γ計(jì)數(shù)儀檢測(cè)。

GAD抗體是SMS和1型糖尿病特異性的血清標(biāo)志物,在其他疾病如多內(nèi)分泌腺的自身免疫性疾病均陰性。GAD抗體對(duì)臨床特征顯著的SMS患者,其診斷靈敏度可達(dá)100%。當(dāng)SMS、1型糖尿病共存時(shí),由于1型糖尿病的存在易造成SMS漏診。GAD抗體可有效地鑒別診斷2型糖尿病和遲發(fā)型1型糖尿病。

抗GAD抗體可在SMS和.1型糖尿病患者中檢出,zui初報(bào)道SMS中GAD抗體檢出率為60%,但在zui近的研究中發(fā)現(xiàn)檢出率可達(dá)100%,在1型糖尿病中GAD檢出率在25%~79%之間。雖然被研究群體的遺傳、年齡和性別上的差異可影響陽(yáng)性率,而檢測(cè)靈敏度不高對(duì)陽(yáng)性率也有一定的影響。其真陽(yáng)性率可能在60%一80%。尚未發(fā)現(xiàn)GAD抗體與糖尿病并發(fā)癥間有明確的。

GAD抗體的陽(yáng)性率還受年齡、性別、種族的影響,在ICA陽(yáng)性的一級(jí)親屬和新診斷為1型糖尿病患者中,青春期后的女性患者其GAD抗體陽(yáng)性率較男性及青春期前的女性要高。在亞洲IDDM患者中GAD抗體的陽(yáng)性率尚有爭(zhēng)議,香港、廣州、韓國(guó)、日本與白種人相比,GAD抗體檢出率較低,但也有研究報(bào)道超過(guò)80%的日本患者可檢出GAD抗體。

目前,ICA指標(biāo)廣泛用作臨床前期1型糖尿病的篩選,但其操作相對(duì)繁瑣、重復(fù)性差且僅能半定量。隨著重組GAD蛋白的出現(xiàn),使大規(guī)模檢測(cè)GAD抗體成為可能。然而由于1型糖尿病在一般人群中發(fā)病率相對(duì)較低,少數(shù)假陽(yáng)性的結(jié)果降低了篩選試驗(yàn)的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值?;谶@個(gè)原因,篩選試驗(yàn)多集中在糖尿病患者的一級(jí)親屬中進(jìn)行,他們發(fā)生1型糖尿病的風(fēng)險(xiǎn)率較一般人群高15倍。目前尚無(wú)以GAD抗體為指標(biāo)大規(guī)模篩查IDDM一級(jí)親屬或一般內(nèi)人群的報(bào)道。對(duì)孕婦產(chǎn)前標(biāo)本的回顧性研究發(fā)現(xiàn),zui后發(fā)展為1型糖尿病的孕婦中,82%可檢出GAD抗體,而發(fā)展為非胰島素依賴性糖尿病的孕婦中,檢出率為36%,此外,胰島素療法并不改變1型糖尿病患者GAD抗體的陽(yáng)性率。

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