化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
炭疽免疫電化學發(fā)光技術(shù)
閱讀：499 發(fā)布時間：2011-7-6化學發(fā)光指在氧化過程中，有一中間產(chǎn)物或終末產(chǎn)物，因能吸收能量而處于激發(fā)狀態(tài)，并以化學發(fā)光的形式放出能量?；瘜W發(fā)光免疫分析的基本原理是將發(fā)光劑的衍生物加到免疫反應(yīng)體系中，取代放射性同位素、酶、熒光等標記物，zui后通過某種儀器測量反應(yīng)過程中產(chǎn)生光子的多寡，從而推算被測物質(zhì)的量。
ECL一般采用Ru（bpy）2+3、TPA作為氧化還原劑。加強的免疫電化學發(fā)光技術(shù)（1ECL）用于細菌的檢測。與常規(guī)夾心免疫方法不同的是，該法采用直接的夾心免疫；與常規(guī)化學發(fā)光及熒光技術(shù)相比，其主要優(yōu)點是信噪比高，發(fā)光信號易控制。典型的ECL反應(yīng)中，甚至在生物樣品存在時，因無熒光激活過程也沒有熒光干擾，且電動勢易控制相關(guān)ECL光子強度，與反應(yīng)時間和探針濃度無關(guān)。但也存在順磁珠非特異性吸附及某些化學物質(zhì)干擾化學反應(yīng)造成假陽性的現(xiàn)象。
Gatto Menking等報道用ECL檢測炭疽芽孢桿菌，敏感性達100個／ml；IECL具有高度重現(xiàn)性，對液相中可溶性抗原、核酸有檢測能力。但其影響因素多，且還有好多影響因素目前尚不清楚i抗體的生物素化、磁珠的選擇使得非特異結(jié)合降低。改進的IECI。與常規(guī)IECL相比，敏感性增加了10倍。加強的IECL采用直接夾心免疫法檢測，選用一種親和力常數(shù)zui高的抗體進行*免疫反應(yīng)，敏感性達10個／ml。