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內(nèi)毒素的檢測——鱟試驗法

時間:2022/8/3閱讀:1535
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內(nèi)毒素為革蘭氏陰性細(xì)菌及其它一些微生物如衣原體、立克次氏體、螺旋體、單核細(xì)胞增多李斯特菌等胞壁中的類脂多糖(LipopolysaccharideLPS)成分。內(nèi)毒素對機(jī)體有極為廣泛的作用,可影響到機(jī)體幾乎每一個器官、系統(tǒng)及生物功能。內(nèi)毒素對機(jī)體有多種毒害作用,如熱原性,致死作用,白細(xì)胞減少及增多,斯氏反應(yīng),彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC),骨髓壞死,胚胎骨質(zhì)耗損,血壓下降,血小板凝聚,補(bǔ)體激活Hageman因子激活,誘導(dǎo)血漿原激活劑促進(jìn)前列腺素的合或抑制糖原異生的關(guān)鍵,骨骼肌加速釋放氨基酸等等。因此,臨床上革蘭氏陰性菌感染或膿毒癥時,如并發(fā)毒血癥和內(nèi)毒休克,可有許多病理現(xiàn)象出現(xiàn)。最終可因心、腎、肺、肝等功能的衰竭而發(fā)生死亡。

 

由于很小劑量的內(nèi)毒素即能引起極廣泛的生物作用及病理作用,因此,加強(qiáng)對內(nèi)毒素檢測的研究,便成為臨床、公共衛(wèi)生、藥檢系統(tǒng)等領(lǐng)域的重要課題之一。在臨床上,加強(qiáng)對革蘭陰性菌感染或革蘭氏陰性菌菌血癥、膿毒癥時血清中內(nèi)毒素檢測,有利于及時發(fā)現(xiàn)內(nèi)毒素休克的發(fā)生,以迅速采取果斷的治療。在公共衛(wèi)生及藥檢系統(tǒng)等面,對水源、食品、飲料、各種藥物及生物制品進(jìn)行內(nèi)毒素檢測,可嚴(yán)格控制水源水、食品、飲料、各種藥物、生物制品中的內(nèi)毒素含量,以將其控制在可接受的法定水平以下,有利于保證人民的身體健康。

 

 

鱟試驗法

 

LT法又稱變形細(xì)胞溶解物試驗Limulus amoebocyte lysateLAL,是目前檢測內(nèi)毒最敏感的方法。它比RT法敏感10100倍以上,可測出微量的內(nèi)毒素(0.011 ng/m1 ) 用微光電法及其它的改進(jìn)方法可測到微微克Pg/ml的水平。而在RT法中敏感性高的家兔需注射1.5ng/kg才能引起發(fā)熱,而敏感性低的卻需注射0.5-10ug/ kg才能引起發(fā)熱。

 

LT法可廣泛地用于蘭氏陰性菌感染的快速診斷,對患者的血液、尿液及腦脊液可進(jìn)行直接的檢查。此法亦可用于檢查各種注射劑內(nèi)是否有內(nèi)毒素污染。近十多年來,隨著各種先進(jìn)的手段如同位素標(biāo)記技術(shù),光電技術(shù)、免疫電泳技術(shù)等應(yīng)用LT領(lǐng)域,使LT法得到了許多改進(jìn),敏感性又日益提高。

 

總之,從目前來看,LT法為檢測內(nèi)毒素的最好方法。其主要優(yōu)點就是敏感性高,假陽性少,耗費的試劑量少,且設(shè)備簡單,實驗時間短,適用于臨床、衛(wèi)生事業(yè)及藥檢系統(tǒng)大規(guī)模地進(jìn)行。如能解決好試劑、內(nèi)毒素及操作程序的標(biāo)化問題,則LT法將是檢測內(nèi)毒素的最好方法。

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