美德聲嗜堿性粒細胞活化檢測試劑
美德聲提供的Flow CAST® 基于流式細胞術的嗜堿性粒細胞活化檢測試劑。
Flow CAST® 是一種體外診斷測試，用于定性評估嗜堿性粒細胞在特定過敏原刺激下的活化情況。該測試旨在輔助即時型過敏的診斷，并與其他實驗室測試聯(lián)合使用。
適用范圍
本產品僅供實驗室使用。
檢測原理
Flow CAST® 是一種嗜堿性粒細胞活化測試（BAT），通過在患者全血中體外刺激嗜堿性粒細胞，然后利用流式細胞術測定嗜堿性粒細胞的活化狀態(tài)，從而再現(xiàn)過敏反應。
Flow CAST® 用于通過流式細胞術測定患者全血樣品中的嗜堿性粒細胞活化。我們獨te的標記物組合 – CCR3 和 CD63 – 將 CCR3 檢測嗜堿性粒細胞的簡單設門特性與經過驗證的活化標記物 CD63 的可靠應用合二為一。由于其簡單的方案和智能標記組合，可以在一小時內獲得第一個結果 - 為常規(guī)實驗室提供wan美的條件。
· 細胞染色：使用兩種熒光標記的單克隆抗體進行染色，抗CCR3-PE用于細胞選擇，抗CD63-FITC用于確定活化狀態(tài)。
· 細胞識別：通過CCR3陽性/低側向散射（SSClow）門控識別嗜堿性粒細胞，并通過CD63表達評估其活化狀態(tài)。
· 結果讀取：以CD63陽性嗜堿性粒細胞占所有嗜堿性粒細胞的百分比（%CD63）作為讀數。
結果解讀
結果 | 解讀 |
< 截斷值 | 陰性 |
≥ 截斷值（一種或兩種稀釋度的過敏原） | 陽性 |
截斷值
· 技術截斷值：5%，通過參考范圍研究確定。
· 過敏原特異性截斷值：提高特異性的截斷值（詳見CAST®過敏原手冊）。
臨床性能
過敏原組 | 研究數量 | 敏感性中位數（范圍%） | 過敏患者總數 | 特異性中位數（范圍%） | 對照組總數 |
食物和吸入物 | 5 | 92（81-100） | 311 | 93（80-100） | 240 |
昆蟲毒液 | 2 | 87（73-89） | 79 | 96（95-97） | 39 |
藥物 | 7 | 55（0-68） | 227 | 91（79-100） | 167 |
11項同行評審研究證實了其在區(qū)分過敏性疾病患者和非過敏個體方面的有效性。過敏狀況通過患者的臨床病史、口服食物挑戰(zhàn)、實驗室測試（如皮膚點刺試驗和特異性IgE）或這些方法的組合進行驗證。
性能特征
· 嗜堿性粒細胞回收率：>500個嗜堿性粒細胞/管
· 實驗室內精密度：<25%變異系數（CV），根據CLSI指南EP05-A3和ISO標準15197:2013執(zhí)行
· 重復性：<25%變異系數（CV），根據CLSI指南EP05-A3和ISO標準15197:2013執(zhí)行
IgE非應答者比例低于5%
在一項針對130名健康獻血者的研究中，只有1人對FcERI受體交聯(lián)反應較差，非應答率為0.77%。大多數獻血者（81.5%）表現(xiàn)出強烈反應，活化率超過50%。
每套試劑盒的樣本數量
過敏原數量 | 患者數量 |
|---|---|
1/1濃度 | 25 |
2/1濃度 | 20 |
3/1濃度 | 16 |
預分析
樣本要求
· 樣本類型：DTA全血
· 儲存條件：2-8°C（不可冷凍）
· 處理時間：48小時內處理，藥物過敏原需在24小時內處理
采集
· 使用K-EDTA靜脈穿刺管，至少裝滿一半
· 對于大多數常用的抗組胺藥，在規(guī)定濃度下未檢測到干擾，詳見使用說明書（IFU）。
處理后樣本的儲存
按照標準協(xié)議處理的細胞已固定，固定細胞可在2-8°C下儲存5天以供后續(xù)獲取。
設備
· 配備488 nm（藍色）激光源的流式細胞儀，帶有PE和FITC通道的發(fā)射濾光片
· 水浴或培養(yǎng)箱（37°C）
· 離心機
CAST® 過敏原
需單獨訂購，請參閱過敏原手冊
制備
· 用250μl刺激緩沖液重懸過敏原
· 每瓶過敏原最多可進行4次刺激
· 使用新鮮復溶的過敏原進行刺激
樣本制備布局
為每位患者準備單獨的試管用于對照和待檢測的過敏原：
· PB=患者背景
· PC1=抗FcE（epsilon糖蛋白）RI Ab刺激對照
· PC2=fMLOP刺激對照
· A1-1=過敏原1稀釋度1
· A1-2=過敏原1稀釋度2，以此類推
刺激和染色
向每個試管中加入：
1. 50 μl刺激物
2. 100 μl刺激緩沖液
3. 50 μl全血
4. 20 μl染色劑
輕輕混合并孵育
紅細胞裂解
向所有試管中加入2.0 ml預熱的（18-28°C）裂解試劑
在18-28°C下孵育5-10分鐘，并以500xg離心5分鐘
加入300 μl含固定劑的洗滌緩沖液重懸細胞沉淀
根據所使用的流式細胞儀進行調整
獲取樣本
在流式細胞儀上獲取樣本，或在光保護下孵育30分鐘后固定，2-8°C儲存以供后續(xù)獲取，最多可儲存5天
訂購代碼
FK-CCR 100次測試
CE0123
我們的用戶
美德聲提供的產品廣泛應用于各類臨床實驗室，公共衛(wèi)生中心實驗室，CDC疾病控制中心實驗室等需要高質量檢測單位。
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